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      標準菌株中的溶源性細菌鑒定方法如何

      作者: 發布于:2017-11-20 16:14:37 點擊量:

      標準菌株目前所包含的菌株種類比較多,而且用途也比其他細菌品種多很多,鑒于它的這一個特點,我們就來給大家做一下這種微生物菌株品種的鑒定方法介紹,希望大家對它有個全面的認識。這次我們主要介紹的是標準菌株中的溶源性細菌,因為它的普及比較廣,研究意義比較大,所以先給大家做一下介紹。

      1.溶源菌培養 將經LB斜面活化的大腸桿菌225(λ),接種于裝有20mlLB培養液的250ml三角瓶內,30℃振蕩培養16h,再從中取2ml菌懸液接入另裝有20ml LB培養液的250ml三角瓶內,37℃振蕩培養2h至對數期。

      2.排除游離噬菌體 如待檢菌株為芽孢桿菌,可先制成孢子懸液,再經80℃ 10min處理,殺死溶源菌表面可能吸附的及游        離的噬菌體;如待檢菌抹為非芽孢桿菌,可利用噬菌體制備的抗血清或0.2%檸檬酸鈉溶液洗滌對數期溶源菌細胞,除去表面吸附的及游離的噬菌體。然后經4000r/min離心10min,上清液可加人敏感指示菌做雙層平板測定,用于檢驗樣品屮足孖釕游離的噬菌體及吸附「溶源菌表曲的噬菌體,離心后的菌體細胞進行誘導處理。

      3.誘導溶源菌 離心后收集的菌體用無菌生理鹽水洗滌兩次,用生理鹽水或100mmol/l Tris-HCL緩沖液(pH7.0)制成終濃度為1011個/ml細胞的菌懸液,每皿加5ml菌懸液,經紫外燈30W,距離30cm、照射30s,立即加入5ml雙倍濃度的LB培養液,混勻后37℃黑暗中培養2h。

      4,溶源性菌株檢查 按雙層瓊脂法操作,取上述誘導裂解液加入幾滴氯仿,以10倍稀釋法適當稀釋,選擇后3個稀釋度的稀釋液,毎個稀釋液取0.3ml與0.2ml對數期敏感大腸桿菌226菌懸液混勻,再加入融化后冷卻至45℃的LB半體培養基,立即混勻,隨即傾入LB固體培養基平板上,待凝固后,37℃培養6h觀察。經過培養的平板如果有大量噬菌斑出現就證明被檢菌株是溶源菌。

      以上幾項都是我們標準菌株研發人員在長期的工作過程中所總結的關于溶原性細菌的鑒定方法介紹,希望大家可以多了解一下,看完以后有不清楚的地方可以和我們共同探討一下。我們公司目前產品有新一代成品培養基、3分鐘培養基、菌種、定量菌種、菌株、物表擦拭采樣管、病毒采樣管等微生物檢測產品,未來還有更多標準菌株研發出來介紹給大家。




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